电泳的分类
目前所采用的电泳方法,大致可分为3类:显微电泳,自由界面电泳和区带电泳.区带电泳应用广泛,区带电泳可分为以下几种类型:
按支持物的物理性状不同,区带电泳可分为:
(1)滤纸为支持物的纸电泳;
(2)粉末电泳:如纤维素粉,淀粉,玻璃粉电泳;
(3)凝胶电泳:如琼脂,琼脂糖,硅胶,淀粉胶,聚丙烯酰胺凝胶电泳;
(4)缘线电泳:如尼龙丝,人造丝电泳
2.按支持物的装置形式不同,区带电泳可分为:
(1)平板式电泳:支持物水平放置,是最常用的电泳方式;
(2)垂直板电泳:聚丙烯酰胺凝胶可做成垂直板式电泳.
(3)柱状(管状)电泳:聚丙烯酰胺凝胶可灌入适当的电泳管中做成管状电泳.
3.按pH的连续性不同,区带电泳可分为:
(1)连续pH电泳:如纸电泳,醋酸纤维素薄膜电泳;
(2)非连续pH电泳:如聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳;
(四)电泳所需的仪器
电泳所需的仪器有:电泳槽和电源.
1.电泳槽
电泳槽是电泳系统的核心部分,根据电泳的原理,电泳支持物都是放在两个缓冲液之间,电场通过电泳支持物连接两个缓冲液,不同电泳采用不同的电泳槽.常用的电泳槽有:
(1)圆盘电泳槽:有上,下两个电泳槽和带有铂金电极的盖.上槽中具有若干孔,孔不用时,用硅橡皮塞塞住.要用的孔配以可插电泳管(玻璃管)的硅橡皮塞.电泳管的内径早期为5~7mm,为保证冷却和微量化,现在则越来越细.
(2)垂直板电泳槽:垂直板电泳槽的基本原理和结构与圆盘电泳槽基本相同.差别只在于制胶和电泳不在电泳管中,而是在块垂直放置的平行玻璃板中间.
(3)水平电泳槽:水平电泳槽的形状各异,但结构大致相同.一般包括电泳槽基座,冷却板和电极.
电源
要使荷电的生物大分子在电场中泳动,必须加电场,且电泳的分辨率和电泳速度与电泳时的电参数密切相关.不同的电泳技术需要不同的电压,电流和功率范围,所以选择电源主要根据电泳技术的需要.如聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS电泳需要200~600V电压.